1- la première méthode consiste à mesurer l'absorbance de la solution d'ADN à 260 nm.
L'ADN simple brin absorbe plus que l'ADN double brin à 260 nm. On a:
2- une deuxième méthode consiste à passer la solution d'ADN sur une colonne d'hydroxylapatite. L'hydroxylapatite fixe l'ADN double brin et il ne reste donc plus que l'ADN simple brin dans l'éluat. Un simple dosage permet de connaître la quantité d'ADN élué et donc la proportion d'ADN simple brin présent dans la solution initiale.
3- la troisième méthode consiste à filtrer la solution sur une membrane de nitrocellulose. L'ADN simple brin se fixe sur la membrane et seul l'ADN double brin est élué. Un simple dosage permet de connaître la quantité d'ADN élué et donc la proportion d'ADN simple brin présent dans la solution initiale.
L'expérience consiste à mesurer la dissociation d'ADN initialement double brin en solution en fonction de la température. La concentration de l'ADN dans la solution est connue. Indiquer, pour ces trois méthodes, comment varie la proportion d'ADN simple brin en fonction de la température. Les méthodes présentées ci-dessus sont-elles équivalentes et donnent-elles le même résultat ? Commentez.
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