Travaux dirigés: hybridation moléculaire et PCR

 

Exercice 15

 

15- Cartes de restriction d'un ADNc et du clone génomique correspondant

Les clones génomiques et l'ADNc d'une enzyme phosphatase ont été isolés. D'après les résultats suivants, les caractéristiques structurales du gène et de son transcrit peuvent être déterminées.

Carte de l'ADNc:
Le fragment d'ADNc a été retiré du plasmide et ses extrémités ont été marquées au 32P. Il a ensuite été digéré par des enzymes de restriction. Les analyses donnent les résultats suivants:

a. Déterminez la carte de l'ADNc.

Carte de l'ADN génomique:
Le fragment d'ADN génomique est extrait d'un clone de phage lambda par digestion Eco RI, puis ses extrémités sont marquées au 32P. Il a ensuite été digéré par des enzymes de restriction. Les analyses donnent les résultats suivants:

b. Dessinez la carte génomique du fragment, en positionnant les sites de restriction.

c. Quelle part du gène représente le fragment génomique de 3,0 kb?

d. Une sonde d'ADNc marquée hybride avec les fragments génomiques de 3,4 et 2,2 kb. Le fragment Taq I de 1,2 kb hybride avec le fragment génomique de 3,4 kb. Si le gène de la phosphatase est présent en simple copie, à quel(s) fragment(s) génomique(s) s'hybridera le fragment Taq I de 1,1 kb?

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Réponse à l'exercice